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醋酸美侖孕酮、醋酸氯地孕酮和醋酸甲地孕酮為合成的孕激素類藥物,有明顯的孕激素和抗雄激素作用,可抑製排卵。孕激素對垂體促性腺激素的釋放有一定的抑製作用,動物實驗表明有死胎率增加和致畸作用,副作用有:(1)惡心、頭暈、倦怠;(2)突破性出血;(3)孕期服用,會增加女性後代的男性化作用。孕激素類藥物能增強體內物質沉積和改善生產性能,可以很快產生顯著和直接的經濟效益,因此,對生產者有很大的吸引力。畜牧業中使用孕激素類藥物(非治療用途)已有很長的曆史,但人類長期食用含有激素的肉製食品,即使含量甚微,亦會明顯影響機體的激素平衡,而且有致癌危險,對幼兒造成發育異常等危害。因此,開發一種能檢測孕酮殘留量的方法是十分必要的。本文采用液相色譜法對牛和豬脂肪樣品中的孕酮進行檢測.
1 試劑與儀器
1.1 試劑 醋酸美侖孕酮、醋酸氯地孕酮和醋酸甲地孕酮標準品,乙腈,甲醇,乙酸乙酯,其他試劑為分析純。水由淨化係統製得。
(1)標準儲備液:1000μg/ml,分別準確稱取0.05g 醋酸美侖孕酮、醋酸氯地孕酮和醋酸甲地孕酮標準品於50ml容量瓶中,用甲醇定容。於4℃保存,可使用一年。
(2)混合中間溶液I:100μg/ml,分別吸取10.0ml 醋酸美侖孕酮、醋酸氯地孕酮和醋酸甲地孕酮標準儲備液於100ml 容量瓶中,用甲醇定容。於4℃保存,可使用一年。
(3)混合中間溶液II:1.0μg/ml,取1.00ml 混合中間溶液I於100ml 容量瓶中,用甲醇定容。於4℃保存,可使用半年。
(4)混合標準工作液:分別吸取10、20、40、80、100μl 混合中間溶液II 添加到980、970、950、910、890μl 的乙腈-水(65:35)中,再加入10μl 0.2%鹽酸溶液,混勻,得到濃度為0.010μg/ml、0.020μg/ml、0.040μg/ml、0.080μg/ml 和0.10μg/ml 混合標準工作液,供液相色譜測定,當日使用。
1.2 儀器 LC7000 液相色譜係統,LC7011泵體,LC7020 紫外-可見檢測器,Hanon-Clarity色譜軟件。氮吹儀;猫咪网址全自動固相萃取裝置;低溫離心機;渦旋混勻器;CN 固相萃取柱。
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